 4-氯鄰苯二酚 4,5-二氯兒茶酚 3,4,5-三氯鄰苯二酚/3,4,5-三氯兒茶酚 3,4,5,6-四氯-1,2-苯二醇 4,5-二氯愈創木酚 4,5,6-三氯愈創木酚 3,4,5-三氯愈創木酚 四氯愈創木酚 4,5-二氯藜蘆醚 3,4,5-三氯藜蘆醚 四氯藜蘆醚 4-氯-2-甲氧基苯酚 三氯紫丁香醇 5,6-二氯香蘭素 2-氯-4-羥基-5-甲氧基苯甲醛 4,6-二氯愈創木酚 3,5-二氯鄰苯二酚/3,5-二氯兒茶酚 3,4,6-三氯鄰苯二酚/3,4,6-三氯兒茶酚 3,4-二氯鄰苯二酚/3,4-二氯兒茶酚 脫氫松香酸 松香酸 新松香酸 異海松酸 左旋海松酸 長葉松酸 山達海松酸 一氯脫氫松香酸 二氯脫氫松香酸 對甲基羅漢松酸 海松酸 二氫異海松酸 8(14)-二氫松香酸 8-二氫松香酸 7-羰基脫氫松香酸 9,10-二氯硬脂酸 甲磺酸帕珠沙星消旋體對照品 匹伐他汀鈣對照品(獨家帶有晶型分析) 鹽酸吡柔比星參比制劑 1,1-二溴丙酮 1,1,1-三溴丙酮 1,1,3-三溴丙酮 1,1-二溴-3-氯丙酮 1,1-二溴-3,3-二氯丙酮 1,3-二溴-1,3-二氯丙酮 1,1,3-三溴-3-氯丙酮 1,1,3,3-四氯乙酮 1,1,1,3-四氯丙酮 一氯硝基甲烷 二氯硝基甲烷 一溴二氯硝基甲烷
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| 頭孢菌素類仿制藥的雜質譜研究 |
| 2018-11-12 |
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頭孢菌素仿制品種需按照ICH的雜質研究指導原則和EMA的《抗生素有關物質標準制訂指導原則》相關要求,對每一個品種進行相應的雜質譜研究。但國內仿制品種眾多,且頭孢菌素雜質譜的研究具有量少且不穩定的特點。按照傳統的制備分離方法,工作繁雜且有效性差。本論文結合已上市品種的雜質研究信息,根據共有的降解反應機理,采用柱切換-液質聯用的方法,分別對已知結構信息雜質、未知結構信息雜質中異構體雜質、聚合物雜質分別進行研究。建立雜質研究決策樹,并提出相關研究規則,其主要內容分為三個部分：1.采用柱切換-LC/MS/MSn和柱切換-HRMS技術對頭孢孟多酯鈉、頭孢唑肟鈉混合雜質對照品、頭孢替唑鈉混合雜質對照品、頭孢曲松鈉混合雜質對照品進行系統研究。建立了頭孢菌素類仿制藥物已知結構信息雜質研究的決策樹：利用雜質譜分析確定雜質數目,通過降解試驗來判斷是工藝雜質或者是降解雜質,采用LC/MS技術確定目標雜質分子量,并根據原料藥的質譜裂解規律分析,推測雜質的可能結構,最后通過高分辨質譜確證元素組成,確證雜質結構式。2.采用制備液相富集異構體雜質,利用光譜、質譜和核磁共振技術對頭孢孟多酯鈉、頭孢唑肟鈉混合雜質對照品、頭孢替唑鈉混合雜質對照品、頭孢曲松鈉混合雜質對照品中異構體雜質進行系統研究。根據實驗方法及研究結果,建立頭孢菌素類仿制藥物未知結構信息雜質—異構體雜質研究的決策樹：利用液質方法確定雜質為異構體,結合紫外光譜數據,判斷最大吸收波長是否一致,如果不一致,且發生藍移,推測為△-3異構體雜質,利用多級質譜中存在的特征性碎片離子,驗證雜質為△-3異構體；如果一致,結合結構特點和降解試驗來判斷異構體雜質種類：光降解試驗產生順反異構體,部分頭孢菌素品種通過二級質譜的特征碎片離子可確證結構；堿性降解試驗產生RS異構體,其他降解試驗產生側鏈異構體,利用光譜和質譜技術不能確證分析雜質結構,可通過制備液相富集純化目標雜質,利用核磁技術確證結構。3.利用中國藥典的頭孢菌素類有關物質檢查方法,調整有機相比例,通過柱切換-LC/MS/MSn技術研究頭孢唑肟鈉、頭孢氨芐、頭孢嗪咪鈉、頭孢噻肟鈉、頭孢西丁鈉中二聚體雜質,推測各類型聚合物雜質的聚合方式,對聚合雜質類型進行總結。建立十八烷基硅膠柱對聚合物的檢查方法,經方法學驗證,所建立的方法可滿足二聚體雜質的有關物質檢查。根據研究內容,分別建立各類雜質研究決策樹,并提出研究規則：規則1.如果雜質峰的保留時間,UV光譜和MS信息(分子量和二級質譜碎片)與對照品相同,則認為雜質與對照品結構一致。規則2.對工藝雜質(反應前體、起始物、中間體),如可以獲得實物,可參照規則1確認結構：如無法獲得實物,應結合MS裂解規律和HRMS數據對結構進行確證。規則3.對降解雜質,如具降解反應機理明確,如β-內酰胺開環、3位側鏈水解等,可根據反應機理設計加速試驗驗證降解物是否符合已知的降解機理,并參照規則2對結構進行確證。規則4.對異構體雜質,除了△3異構和7位具有氨噻肟結構的頭孢菌素的反式異構,可通過光譜、質譜技術確證結構外,其他還需要結合NMR等分析結果確證結構；對R、S異構體至少需要H1 NMR數據確證異構位點。規則5.建立十八烷基硅膠柱檢查聚合雜質方法,可通過柱切換—LC/MS/MSn可確定其類型(二聚體、三聚體),并經柱切換—HRMS技術驗證結構,但無法判斷其聚合位點。本論文的研究內容是β-內酰胺類抗生素雜質譜研究中的一部分,本研究內容有助于藥物分析工作者快速、準確、有效的分析頭孢菌素類仿制藥的雜質譜,有利于國內頭孢菌素類仿制藥的質量標準提高,快速提升國內制藥企業的仿制藥生產水平,保障頭孢類藥物用藥的安全性和有效性。
【學位授予單位】：北京協和醫學院
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